Düşük bağlayıcı pipet ipuçlarını anlamak

1. Düşük bağlayıcı pipet uçları nelerdir?

Düşük bağlayıcı pipet uçları özel yüzey tedavileri içeren ve/veya belirli malzemelerden yapılmış pipetçiler (pipetler) için tasarlanmış laboratuvar sarf malzemeleridir. Temel tasarım hedefleri İpucu iç duvarında numune adsorpsiyonunu ve tutmayı önemli ölçüde azaltın .

• Temel Sorun: StVeart polipropilen uçları, bazı numune bileşenlerinin, özellikle biyomoleküllerin (proteinler, nükleik asitler gibi) ve viskoz çözeltilerin spesifik olmayan adsorpsiyonuna yol açabilecek doğal hidrofobiklik ve yüke sahip yüzeylere sahiptir.
• Çözüm: Düşük bağlanma uçları, fiziksel veya kimyasal yöntemlerle iç duvarın yüzey özelliklerini değiştirerek daha hidrofilik ve inert hale getirerek moleküller ve uç duvarı arasındaki etkileşim kuvvetlerini azaltır.

2. Nasıl Çalışırlar (Yüzey İşlem Teknolojileri)

Düşük bağlanma etkisi öncelikle aşağıdaki teknolojilerle elde edilir:

• Özel Polimer Katkı Maddeleri: Üretim sırasında polipropilen baz malzemesine spesifik polimer katkı maddelerinin (örn. Hidrofilik değiştiriciler) dahil edilmesi, uç gövdeye doğal düşük bağlayıcı özellikler verir. Bu, mevcut ana akım ve en kararlı yöntemdir.
• Yüzey Kaplamaları:
  • Hidrofilik kaplamalar: Yüzey ısınabilirliğini arttırmak, sıvı tutmayı ve protein adsorpsiyonunu azaltmak için iç duvara hidrofilik bir kaplama (örn. Bazı polimer kaplamalar) uygulanması.
  • ANTERT KAPALAR: Yüzey aktif yerlerini azaltmak ve kimyasal adsorpsiyonu en aza indirmek için yüksek orVea inert kaplamaların (örn. Bazı silan türevleri) uygulanması.
• Özel Yüzey Tedavileri: Hidrofilikliği arttırmak için fiziksel yöntemler (örn. Plazma tedavisi) veya kimyasal dağlama yoluyla polipropilen yüzeyin mikroyapı ve kimyasal özelliklerinin değiştirilmesi.
• Ultra yüksek saflık polipropilen: Koşulların neden olduğu potansiyel adsorpsiyon bölgelerini azaltmak için son derece düşük safsızlık içeriğine sahip polipropilen hammadde kullanılması.

3. Temel avantajlar ve özellikler

• Örnek kaybını en aza indirir: Bu temel avantajdır. Uç duvarda değerli, düşük konsantrasyon veya dakika örneklerinin (örn. Proteinler, DNA, RNA, enzimler, antikorlar, hücre süspansiyonları, viskoz reaktifler) adsorpsiyonunu ve tutulmasını önemli ölçüde azaltır. kesinlik and iyileşmek .
• Deneysel hassasiyet ve tekrarlanabilirliği geliştirir: Azaltılmış adsorpsiyon, daha tutarlı dağıtım hacimleri, numune taşımasının neden olduğu deney hatalarını azaltma ve sonucu artırma anlamına gelir. güvenilirlik and tekrarlanabilirlik .
• Çapraz kontaminasyon riskini azaltır: Daha eksiksiz sıvı sınır dışı edilmesi ve daha az numune kalıntısı, farklı numuneleri sırayla pipetlerken çapraz kontaminasyon riskini düşürür.
• Hassas uygulamalar için ideal: Örnek aktivitesi üzerindeki etkiyi en aza indirerek onları moleküler biyoloji, hücre biyolojisi, proteomik, teşhis vb.
• Wettable'ı geliştirir: Tipik olarak daha iyi hidrofiliklik sergiler, sıvının uç içinde daha düzgün akmasına izin verir, menisküs yapışmasını ve kabarcık oluşumunu azaltır ve daha yumuşak pipetleme işlemine yol açar.

4. Temel uygulamalar (özellikle bunlara ihtiyaç duyan deneyler mi?)

Aşağıdaki uygulamalar için düşük bağlanma uçları şiddetle tavsiye edilir, neredeyse gereklidir:

• Moleküler Biyoloji:
  • Yüksek verimli PCR, QPCR, DDPCR: DNA/şablon kaybını azaltarak amplifikasyon verimliliğini ve nicelleştirme doğruluğunu sağlar.
  • Nükleik asit saflaştırması ve kütüphane hazırlığı: Saflaştırma sırasında değerli DNA/RNA fragmanlarının kaybını önler.
  • NGS Örnek Hazırlama: Dakika kütüphanelerinin hassas pipetlemesi kritiktir.
• Protein Araştırması:
  • Protein konsantrasyon deneyleri (BCA, Bradford, vb.): Protein adsorpsiyonunu önler ve konsantrasyonun hafife alınmasına yol açar.
  • Enzim aktivitesi deneyleri/kinetikler: doğru enzim miktarı sağlar ve aktivite kaybını önler.
  • Western blot numunesi hazırlama: SDS içeren veya azaltma maddeleri içeren tamponlardaki proteinlerin hassas pipetlenmesi.
  • Protein saflaştırması (örn. Afinite kromatografisi fraksiyon koleksiyonu): Hedef protein kaybını önler.
• Hücre Kültürü ve İlgili Deneyler:
  • Geçiş/kaplama değerli hücre çizgileri veya birincil hücreler: Uç içindeki hücre yapışma kaybını azaltır.
  • Hücre canlılık deneyleri: Hücre süspansiyonlarının ve reaktiflerin doğru pipetlemesi.
  • Transfeksiyon: DNA, RNA, transfeksiyon reaktif komplekslerinin hassas pipetlemesi.
• Teşhis ve Klinik Test: ELISA, Kemilüminesan immünoanalizler, POCT: Hassas numune ve reaktif hacimlerini sağlar, tespit duyarlılığını ve doğruluğunu artırır.
• Viskoz veya köpük eğilimli çözümler: Gliserol, DMSO, yüzey aktif madde çözeltileri, bazı tamponlar: tutma ve aktarımı azaltır, pipetleme doğruluğunu iyileştirir.
• Değerli, dakika örneklerini içeren veya yüksek hassasiyet ve tekrarlanabilirlik gerektiren herhangi bir deney.

5. Sağ düşük bağlayıcı pipet ucu nasıl seçilir?

• Uyumluluk: Birincil gereksinim, mutlak Pipet markanız ve modelinizle mükemmel uyumlu olun. Satın almadan önce her zaman uyumluluk listelerini doğrulayın veya üreticinin kılavuzuna danışın.
• Sertifikalar ve Kalite:
  • Sertifikalı RNase/DNase/Pirojensiz: Moleküler biyoloji ve hücre kültürü deneyleri için çok önemli. Güvenilir sertifika sağlayın.
  • Sertifikalı PCR inhibitörü içermez: PCR/QPCR uygulamaları için çok önemli.
  • Üretim Kalitesi: Yüksek kaliteli üretim, hassas boyutlar, tutarlı şekil, çapak yokluğu ve partikül kontaminasyon eksikliği (temizlik derecesi) sağlar. Saygın markaları seçin.
• Düşük bağlanma performans seviyesi: Performans markalar ve seri arasında değişebilir. Üretici tarafından sağlanan performans verilerine dikkat edin (örneğin, protein adsorpsiyon kalıntısı testi raporları). Son derece zorlu uygulamalar için (örneğin, tek hücreli sekanslama, ultra düşük bolluk protein tespiti), üst katmanlı düşük bağlanma uçları gerekebilir.
• Ambalaj ve Sterilite:
  • Ambalaj Biçimi: Raflı (yığılmış veya dökme), torbalanmış, filtrelenmiş (isteğe bağlı). İş akışınıza uygun ambalajı ve otomasyon ihtiyaçlarını seçin.
  • Filtrelenmiş uçlar: Pipet şaftının aerosol kontaminasyonunu önlemek gerekiyorsa, filtrelerle düşük bağlanma uçlarını seçin (düşük bağlanma filtre uçları). Filtrenin kendisi de düşük bağlayıcı olmalıdır.
  • Önceden sterilize: Çoğu deney, önceden sterilize edilmiş uçlar gerektirir (tipik olarak gama ışınlanmış). Sterilizasyon yöntemini ve sterilite güvence seviyesini (SAL) doğrulayın. Steril olmayan ipuçları bazı kritik olmayan uygulamalar için veya laboratuvar kendi sterilizasyonunu gerçekleştiriyorsa uygundur.
• Maliyet etkinliği: Düşük bağlanma uçları genellikle standart uçlardan daha pahalıdır. Performans gereksinimlerini karşılarken maliyet etkinliğini değerlendirin. Maliyet tasarrufu için standart ipuçları kullanarak kritik deneylerden ödün vermeyin, çünkü yanlış veri veya örnek kaybı daha fazla atık sağlayabilir.

6. Kullanım Notları

• Uygun ek: Hava sızıntısını ve yanlış hacimleri önlemek için uçun boşluklar olmadan pipete güvenli ve rahat bir şekilde bağlandığından emin olun.
• Ön ıslatma: Viskoz veya uçucu sıvılar için, önceden ıslatma (sıvıyı gerçek transferden birkaç kez aspirasyon ve dağıtmak) bazen doğruluğu daha da artırabilir (düşük bağlanma uçlarında bile). Pipet çalışma yönergelerini takip edin.
• Uç uçlarına dokunmaktan kaçının: Steriliteyi koruyun ve kontaminasyonu önleyin.
• Depolamak: Doğrudan güneş ışığından ve tozdan uzakta serin, kuru bir yerde saklayın. Ambalajdaki son kullanma tarihine dikkat edin.